二手高效液相色譜儀工作時(shí)，儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出。
 

　　二手高效液相色譜儀通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)液相色譜儀主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
 

　　四元低壓梯度的混合比例是通過(guò)控制不同流路的電磁閥的開(kāi)閉時(shí)間長(zhǎng)短來(lái)控制的，理論上混合的比例也是準(zhǔn)確的，但是實(shí)際上電磁閥的開(kāi)閉會(huì)有一個(gè)延遲，無(wú)論它動(dòng)作多么快，總還是需要一點(diǎn)時(shí)間的。比如A路和B路各50%混合，在單位時(shí)間內(nèi)，A路和B路的電磁閥各開(kāi)通50%的時(shí)間，這時(shí)問(wèn)題不大，電磁閥的延遲影響可以通過(guò)調(diào)整補(bǔ)償系數(shù)來(lái)盡量彌補(bǔ)。但是如果ji端一點(diǎn)的情況，A路99%，B路1%，這種情況下單位時(shí)間內(nèi)，A路的電磁閥開(kāi)通99%的時(shí)間，B路只占1%，時(shí)間是很短的，這時(shí)B路電磁閥的延遲就影響很大了，甚至可能延遲的時(shí)間比工作的時(shí)間還要長(zhǎng)，而高壓梯度就不會(huì)存在這種問(wèn)題。
 

　　對(duì)檢測(cè)器的要求：靈敏度高、重現(xiàn)性好、線性范圍寬、死體積小、對(duì)溫度及流量的變化不敏感等。主要有紫外檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、示差檢測(cè)器等。示差檢測(cè)器是一種通用型檢測(cè)器，理論上可以檢測(cè)幾乎所有的化合物。其原理是基于含樣品的洗脫劑和洗脫劑二者折光指數(shù)的差異。示差檢測(cè)器受壓力變化、溫度變化、流動(dòng)脈沖的影響較大，不適合進(jìn)行梯度洗脫。